Слюна для определения уровня глюкозы
Болезни метаболизма, такие как сахарный диабет, влияют на концентрацию глюкозы во многих биологических жидкостях, в том числе и в слюне. Уровень глюкозы в слюне, в свою очередь, оказывает прямое воздействие на состав микрофлоры полости рта, что может увеличивать риск развития стоматологических заболеваний.
Исследование было опубликовано 1 марта 2017 года в издании «PLOS ONE». В ходе исследования измерялись уровень глюкозы в слюне, общее количество бактерий и выделялось 42 вида микроорганизмов полости рта.
Слюна собиралась у 8173 детей (жители Кувейта) в возрасте 10 лет (используя ДНК анализаторы).
Из пациентов, чьи образцы слюны были собраны, исследователи составили базу, в которой отобразили уровень их физической подготовки (признаки гиподинамии и ожирения, кариеса и гингивита).
Данные были сравнены между пациентами с высоким и низким содержанием глюкозы в слюне.
Исследуемая группа на 61,1% состояла из девочек и на 38.9% из мальчиков. Существенно выше процент мальчиков имел ожирение в сравнении с девочками (38,2 % против 31,0%) и выше значения концентрации глюкозы по сравнению с такими же показателями у девочек (0,22 ед. против 0,18 ед.).
В 88% случаев (37 видов бактерий) имелись статистически значимые различия в составах между группами с высоким и низки содержанием глюкозы.
Основополагающим значением при этом была кислотоустойчивость, самым чувствительным оказался вид Prevotella, а самым резистентным Streptococcusmutans.
Имеются существенные изменения в количестве и составе микрофлоры в слюне пациентов с лишним весом и ожирением в сравнении с пациентами с нормальным весом
J.Max Goodson, доктор медицинской школы Гарвардского университета цитаты.
Использую различные методы анализа, были выявлены микроорганизмы имеющие самую высокую степень корреляции между их количеством и повышением уровня глюкозы в слюне.
Такими микробами оказались Aggregatibacter actinomycetemcomitans и Prevotella melaninogenica.
Также в 64% видах изменился частотный состав микрофлоры по сравнению с образцам, взятыми у пациентов с низкой концентраций глюкозы в слюне.
Сахарный диабет второго типа строго связан с изменениями в бактериальном разнообразии и частотой встречаемости отдельных видов в поддесневой области, но при этом ассоциация между диабетом и изменениями в бактериальных параметрах слюны до сих пор не до конца ясна.
Goodson и его коллеги также рассчитали процентный состав каждого вида микроорганизма для пациентов с низким и высоким содержанием глюкозы в слюне. Они выявили значительные различия в 26 видах микроорганизмов при условия повышения концентрации глюкозы в слюне. Из них у 15 видов имелось снижение, в то время как у 11 повышение процентного содержания. У 16 видов статистически значимых изменений выявлено не было и значения оставались на том же самом уровне.
«Изменение содержания микроорганизмов находилось в зависимости и в самой большой степени было связано с изменением концентрации глюкозы, в меньше же степени это соотносилось с другими клиническими показателями, такими как уровень кариеса в полости рта, наличие ожирения и другими физическими параметрами исследуемых»,- заключает автор исследования. Таким образом, одним из важнейших выводов этого исследования было подтверждение того, что метаболические патологии, такие как сахарный диабет, выражаясь в повышении глюкозы в крови, изменяют и концентрацию ее в слюне, тем самым влияя на состав микрофлоры полости рта.
Авторы исследования утверждают, что ввиду богатства микрофлоры полости рта и относительной простоты ее изучения, еще раз удалось проследить взаимосвязь между состоянием полости рта и социально значимой болезнью метаболизма. Это еще раз подтвердило мысль о том, что полость рта является одним из ключей к профилактике и здоровому образу жизни.
Первый в мире сенсор контроля уровня сахара в слюне
Консорциум iQ Group Global представил новый биосенсор Saliva Glucose Biosensor, способный определять уровень сахара в крови человека путем анализа слюны.
Это первый в мире подобный неинвазивный тест, который предназначенный для диабетиков.
Напомним, что сегодня во всем мире живет примерно 425 миллионов человек, страдающих сахарным диабетом, которые ежедневно вынуждены контролировать у себя уровень сахара в крови.
Новая система состоит из собственно сенсора глюкозы и мобильного медицинского приложения. Сенсор глюкозы представляет собой небольшую одноразовую полоску, которая при контакте со слюной человека обеспечивает мгновенное измерение уровня глюкозы. Собственно определение уровня глюкозы проводится в режиме реального времени с помощью приложения на мобильном устройстве пациента.
Saliva Glucose Biosensor был изобретен профессором Полом Дастуром и его командой в Центре органической электроники университета Ньюкасла (Австралия). В 2016 году iQ Group Global приобрела биосенсорную технологию и ускорила ее разработку для диагностических приложений.
Основная научная инновация биосенсора заключается в запатентованной транзисторной архитектуре на основе модифицированной органической тонкой пленки. Эта пленка включает в свой состав глюкозооксидазу в качестве чувствительного элемента для инициирования электрохимической реакции, которая производит электрический сигнал.
Этот сигнал может отображаться на мобильном устройстве пациента в режиме реального времени. Биосенсор обладает высокой чувствительностью, поэтому способен определять уровень сахара при существенно меньших концентрациях, чем это характерно для крови.
Он обладает линейной чувствительностью к сахару при концентрациях в 100 раз ниже, чем при использовании современных методик измерения уровня глюкозы в крови.
Что касается точности измерений и работоспособности технологии, то разработчики такой информации пока не предоставили.
Измерения уровня сахара, записанные биосенсором, могут быть визуализированы в режиме реального времени с помощью приложения на мобильном устройстве пациента, причем пациенты могут также просматривать исторические данные измерений и сравнивать их с текущим значением.
Новый сенсор способен открыть широкие возможности для улучшения методов мониторинга и лечения диабета, избавив пациентов от неприятностей, связанных с необходимостью несколько раз в день колоть себя в палец или носить на себе устройство непрерывного мониторинга уровня сахара.
В настоящее время iQ Group Global работает над пилотной программой исследований совместно с университетом Ньюкасла с целью разработки платформы диагностических тестов, которые можно будет использовать в местах оказания первичной медицинской помощи, начиная с систем для опухолевых маркеров, гормонов и инфекционных заболеваний.
Уровень глюкозы теперь будут определять по слюне и слезам
Американские исследователи из Университета Пердью, взяв за основу графен и наночастицы платины, создали сенсор, измеряющий уровень глюкозы в крови по образцам слез, слюны и мочи. Свои сведения группа ученых под руководством Тимоти Фишера опубликовала в августовском выпуске журнала Advanced Functional Materials.
Изготовленный из графена, сенсор состоит из нескольких нанолистов, напоминающих по форме лепестки роз. Платиновые наночастицы, выполняющие функцию электродов прикреплены к краям лепестков. На подложке из графена установлены молекулы глюкозооксидазы.
Этот фермент способствует окислению глюкозы до глюконо-1,5-лактона, который гидролизуется спонтанно до глюконовой кислоты. Реакция также образует пероксид водорода уже после взаимодействия электрода, посредством которого генерируется электро сигнал.
«Как правило, при создании сенсора с помощью нанотехнологий применяется огромное количество производственных процессов, как, например литография, травление и химическая обработка, что приводит к удорожанию итогового продукта. «Нанолепестки» нашего биосенсора выращивать теперь можно на подложке любого типа, без использования дорогих технологий», — отметил Анураг Кумар, один из соавторов исследовательской работы.
Уровень чувствительности биосенсора неинвазивного типа позволяет определять без труда глюкозу в концентрации примерно 0,3 микромоля. Устройство можно, по словам ученых, использовать при определении уровня глюкозы в крови пациента по образцам его слюны, мочи и даже слез.
Заменив глюкозооксидазу другим ферментом, измерить с помощью сенсора можно уровень каких-либо других веществ в организме. Как отмечают ученые, их разработку также можно взять за основу при создании алкотестера или прибора для проверки состояния пациентов, страдающих болезнью Паркинсона или Альцгеймера.
Наночастицы, несущие один из токсинов, который входит в состав пчелиного яда, уничтожают Вирус имуннодифицита человека, не нанося вреда окружающим клеткам, как выяснили учёные из медицинской школы Университета Вашингтона в Сент-Луисе.
Это открытие является важным шагом на пути к разработке вагинального геля, предотвращающего распространение ВИЧ, вируса, вызывающего СПИД.
«Мы надеемся на то, что в тех регионах, где ВИЧ распространяется со скоростю эпидемии, люди смогут использовать этот гель в качестве предупредительной меры
Американские ученые разработали несколько новых видов пломбировочных материалов с антибактериальными и реминерализующими свойствами, как сообщает Medical Xpress.
Группа исследователей под руководством Хуакунь Сюй (Huakun Xu) из Мэрилендского университета надеется, что материалы, созданные с помощью нанотехнологий, могут прослужить не менее 10 лет.
Как известно, кариес образуется под воздействием вредных веществ, вырабатываемых микроорганизмами, что способствует разрушению зубной эмали.
Туберозный склероз – болезнь, развитие которой связано с мутацией в одном из двух супрессорных генов опухоли, TSC1 или TSC2, вызывает рост доброкачественных опухолей по всему организму и коже.
Эти опухоли могут нанести эстетический вред внешнему виду человека, а также серьезно повредить внутренние органы.
Рост опухолей в мозге может вызвать приступы, припадки, а наличие таких новообразований в почках, печени или сердце может нарушить нормальную функцию органа, вплоть до того,
6 инновационных устройств для измерения уровня сахара в крови
Фитнес и здоровьеДиабет — это хроническая болезнь, при которой тело человека не производит в достаточном количестве инсулин — гормон, необходимый для переработки сахара и другой пищи в энергию. Существует два типа диабета и при лечении обоих типов используется инсулин, диабет 2 типа может также контролироваться медикаментами. Однако инсулин и некоторые лекарства могут вызвать гипогликемию, характеризующуюся аномально низким уровнем глюкозы в крови. Для всех больных диабетом или гипогликемией очень важно контролировать свой уровень сахара с помощью глюкометра. Это небольшое компьютеризированное устройство измеряет и показывает ваш уровень сахара в крови.
Упражнения, еда, медикаменты, стресс и множество других факторов могут повлиять на этот уровень, поэтому регулярное измерение уровня сахара позволит вам лучше справляться с этой болезнью, отслеживая любые флюктуации, вызванные различными причинами. Кроме того, сохранение уровня сахара в крови на нормальном уровне позволит человеку предотвратить многие проблемы со здоровьем, связанные с диабетом или гипогликемией. А глюкометр является одним из самых эффективных инструментов для контроля течения болезни.
Принципиально все глюкометры одинаковы. Вставляете тестовую полоску в устройство. Затем колите свой палец иголкой или ланцетом и помещаете капельку своей крови на эту полоску. И ждете, когда показания покажутся на экране.
Основные отличия заключаются в цене, объеме памяти таких устройств, точности измерения (это важно при определении дозы инсулина) и длительности времени тестирования.
Но в последнее время стали появляться новые системы, которые несколько отличаются от всех остальных.
Разнообразие глюкометров велико, но мы представим вам только несколько различных устройств, как уже привычных и зарекомендовавших себя, так и новых, разработчики которых использовали современные технологии, чтобы сделать подобные приборы более удобными для применения.
Это одна из моделей длинной линейки глюкометров компании Roche с общим названием Accu-Chek, отличающаяся легкостью использования и быстротой проведения измерений (5 сек).
Небольшое устройство (габариты 69х43х20 мм, вес 60 г.
) характерно своим солидным набором функций, среди которых: подсветка экрана, возможность ставить метки, уточняющие, до или после еды было проведено измерение, связь с компьютером, большой объем памяти — на 500 измерений, расчет средних показателей уровня глюкозы за 1, 2 недели или за месяц; наличие будильника, который напомнит о необходимости провести измерение. К тому же, система может распознавать просроченные тестовые полоски.
Aviva определяет уровень сахара по капле крови размером всего в 0,6 мкл, а это означает , что эти измерения не такие болезненные, как было совсем недавно.Тем более, если использовать и устройство для прокалывания Accu-Chek Multiclix, которое может варьировать глубину проникновения ланцета.
- Встроенной батареи хватает на 2000 измерений.
- Устройство может работать со специализированным приложением Accu-Chek для управления данными.
- Цена: $13,99 (Amazon.com)
iHealth Smart Glucometer дополнил длинную линейку различных медицинских устройств компании iHealth, подключенных к смартфону, и позволяет диабетикам легко контролировать уровень сахара в крови в любое время и в любом месте.
Устройство (а это уже вторая версия прибора) может пересылать информацию беспроводным образом в приложение iHealth MyVitals, позволяя пользователям записывать до 500 показаний только в самом устройстве и значительно больше в облачном хранилище.
Пользователь может просматривать тренды изменения уровня сахара в крови, устанавливать напоминания о необходимости проведения измерения или принять лекарство, а также контролировать срок годности тестовых полосок.
Результаты измерений в течение 5 секунд отображаются на светодиодном экране и автоматически передаются по Bluetooth в мобильное устройство на базе iOS. При этом для анализа используется капля крови объемом всего лишь 0,7 мкл.
По данным CNET (октябрь, 2013 г.), вошел в тройку лучших глюкометров, работающих с мобильным устройством
Цена: $29.95
iQuickIt Saliva Analyzer — это глюкометр, определяющий уровень сахара не по анализу крови, а путем контроля слюны. Разработчики этого устройства, работающего в паре со смартфоном, ставили себе целью уменьшить боль при измерениях.
Глюкометр пока не продается и проходит тестирование. Устройство отличается тем, что позволяет измерять не только уровень сахара, но и уровень ацетона в слюне диабетиков.
Ацетон появляется в слюне диабетиков, когда болезнь находится в острой стадии, в диабетическом кетоацидозе, что может быть фатальным.
При этом, если, например, уровень сахара составляет 550, а анализ слюны показал наличие ацетона, мобильное устройство, получившее данные от анализатора, пошлет сообщение пациенту, чтобы он немедленно обратился за врачебной помощью, при этом такое же сообщение отсылается родственникам больного и/или лечащему врачу.
Цена устройства пока не определена.
Калифорнийская компания Glucovation разработала систему постоянного мониторинга сахара в крови SugarSenz, которое может использоваться как диабетиками, так и здоровыми людьми.
Подобно некоторым другим аналогичным системам для диабетиков, устройство прикрепляется (приклеивается) к коже и периодически самостоятельно и безболезненно проникает сквозь кожу для получения образца крови для измерения.
По утверждению разработчиков, система не требует калибровки при помощи крови из пальца. Измерение уровня сахара осуществляется электрохимическим способом с помощью технологии, разработанной в Glucovation.
Датчик может без перерыва работать 7 дней и передавать статистику на смартфон или трекер физической активности каждые 5 минут, позволяя в реальном времени получить анализ того, как диета или физические упражнения влияют на метаболизм. При этом комплексные метаболические данные преобразуются в приложении в метрики, понятные пользователю.
Цена устройства — приблизительно $150, цена сменных датчиков — $20.
Компания GlySens разработала имплантируемую систему мониторинга уровня глюкозы, которая может работать около года, не требуя замены. Система состоит из двух частей. Это датчик, который похож на крышечку от бутылки молока, только более тонкую, который имплантируется под кожу в жировую прослойку.
Он беспроводным образом соединяется с внешним приемником, который чуть толще мобильного телефона. Ресивер показывает текущий уровень глюкозы, последние исторические данные, тенденции, и выдает предупреждающие сигналы при превышении установленного уровня сахара в крови.
Предполагается, что в будущем приемник будет заменен приложением, работающим в мобильном телефоне.
По дизайну система похожа на аналогичные подкожные системы, которые уже доступны на рынке (DexCom, Medtronic, Abbott). Принципиальная разница состоит в том, что сенсоры в существующих системах нуждаются в перекалибровке несколько раз в день и могут оставаться на месте не более недели.
Компания уже провела успешные испытания на шести пациентах с использованием первой версии устройства. Несмотря на то, что в этом варианте сенсор был почти в два раза толще, чем в последующей версии, почти все пациенты, участвующие в испытаниях, через какое-то время просто забыли об имплантированном датчике, утверждают разработчики.
В отличие от конкурентных систем, датчик GlySens отслеживает уровень кислорода, за счет чего и получает свою уникальную стабильность.
Глюкоза и кислород проходят из кровяного потока в мембрану, которая покрывает матрицу электрохимических детекторов. Мембрана покрыта ферментом, который взаимодействует с кислородом.
Измеряя количество кислорода, оставшегося после реакции с ферментом, устройство может вычислять степень ферментативной реакции и, следовательно, концентрацию глюкозы.
Цена устройства пока неизвестна, но, по утверждению разработчиков, он будет не выше стоимости существующих глюкометров.
Socrates Companion принципиально отличается от своих собратьев — это неинвазивный глюкометр. Правда, он существует пока в форме работающего прототипа и для того, чтобы многочисленные давно жаждущие подобного устройства люди должны еще немного подождать.
Разработчики устройства смогли создать совершенно новую технологию измерения уровня сахара — без использования болезненного укола, необходимого для забора крови.
Просто закрепив датчик на своем ухе, пользователь может за несколько секунд получить точный анализ содержания сахара.
Поиски возможности измерения уровня сахара в организме неинвазивным способом продолжаются уже около 20 лет и до сих пор все попытки завершались без успеха, поскольку точность измерений оставляла желать лучшего. Запатентованная технология, используемая в Socrates Companion, эту проблему, как утверждает компания, решила.
В настоящее время устройство ожидает разрешение государственных органов на использование на территории США и пока не поступило в продажу.
Стоимость устройства также пока неизвестна.
Портативное неинвазивное устройство позволит измерять уровень глюкозы в слюне
Сотрудники Университета Брауна в Провиденсе разработали новый сенсор для измерения уровня глюкозы в сложных биологических жидкостях, таких как слюна.
Эта разработка — важный шаг для создания портативных приборов для бытового контроля уровня сахара для людей, страдающих от диабета.
Одновременно это открывает двери для разработки нового поколения высокочувствительных устройств для определения широкого спектра соединений.
Важной частью устройства будет интерферометр. Сам чип представляет собой посеребренный кусочек кварца, в площадью около двух сантиметров. На поверхности серебра нанесены тысячи мельчайших бороздок.
При попадании на поверхность световой волны с серебряной поверхности бороздок выделяются свободные электроны и возникает поверхностный плазмонный резонанс. Волны возбуждения электронов интерферируют с волнами света, и эта интерференция фиксируется детекторами.
Когда чип погружен в жидкость, свет и волны плазмонного резонанса проходят через вещество до момента интерференции, и в зависимости от состава жидкости характер интерференции будет разный.
Интерферометр можно откалибровать на измерение специфических компонентов, например, глюкозы, в очень небольших количествах и с минимальными требованиями к объему образца.
Ученые из университета Брауна, возглавляемые Доменико Пасифиси (Domenico Pacifici) шагнули дальше. Они решили определять не глюкозу, а метаболит ее реакции с ферментами — глюкозооксидазой и пероксидазой хрена.
В результате взаимодействий этих ферментов с субстратами, включающими глюкозу и флуоресцентную метку можно получить окрашенные продукты, которые очень хорошо определяются интерферометрически.
В экспериментах, проведенных Пасифиси и коллегами удалось достичь чувствительности в определении глюкозы в воде 0,1 мкмоль на литр, при физиологических концентрациях в диапазоне 20-240 мкм. Это десятикратно повысило чувствительность по сравнению со стандартной интерферометрией.
Следующим этапом работы будет калибровка устройства для работы со слюной. В конечном счете авторы разработки надеются создать портативное устройство для неинвазивного определения уровня глюкозы, полезное людям с диабетом.
Любопытно, что принцип работы прибора не ограничивается определением глюкозы или других гексоз.
Таким же образом можно определять другие вещества с высокой точностью, например, токсины в воде или воздухе, или контролировать течение химических реакций в реальном времени.
http://remedium.ru/news/detail.php?ID=62104
Чип из серебра и кварца показывает уровень сахара в теле не хуже анализа крови
Ученые разработали новый сенсор-биочип, который замеряет концентрацию глюкозы в слюне, рассказывает The Indian Express. Данное изобретение сможет избавить диабетиков от необходимости проверять кровь. В новом чипе сотрудники Университета Брауна сочетают химические реакции с плазмонной интерферометрией. То есть химические «подписи» соединений находит свет.
В слюне человека концентрация глюкозы в 100 раз ниже, чем в крови. Но комплексный подход позволял ее уловить, причем, с высокой точностью. Значит, сахар можно отделить от других веществ в слюне. Биочип сделан из кварца, покрытого тонким слоем серебра. В серебре скрываются тысячи интерферометров.
Когда свет попадает на чип, желобки в интерферометрах приводят к образованию целой волну свободных электронов, которая устремляется в сторону центральной прорези в интерферометре. Когда же на чип попадает жидкость, свет и поверхностные волны электронов проходят через жидкость, прежде чем вступают в контакт.
Это изменяет схему интерференции в зависимости от состава жидкости, что улавливают детекторы. Меняя расстояние между желобами и центральной прорезью, можно настроить систему на выявление определенных соединений в жидкости. Так и был определен маркер глюкозы.
Потом ученые добавили в чип два канальца с энзимами. Они вступали в реакцию с глюкозой. Первым энзимом была глюкозооксидаза. В результате ее взаимодействия образуется молекула перекиси водорода. Эта молекула уже вступает в реакцию со вторым энзимом — пероксидазой хрена — и производит молекулу резоруфина. Резоруфин поглощает и выделяет красный свет, меняя цвет раствора.
Можно настроить интерферометры на поиски красных молекул резоруфина. Эффективность методики проверили на растворе, напоминающем слюну (смесь воды, солей и энзимов). В итоге система смогла выделить резоруфин в реальном времени с высокой точностью. Аналогичных результатов стоит ожидать и с настоящей слюной.
http://meddaily.ru/article/05Jun2014/serebkvar
Способ определения глюкозы в ротовой жидкости
Изобретение относится к медицине, а именно к терапии и биоорганической химии.
Глюкоза в организмах человека и животных — основной представитель углеводов, входящий в состав важнейших биологических жидкостей: крови, мочи, слюны.
В клинической практике для диагностики патологических состояний используются результаты анализов крови и мочи «на сахар», т.е. содержание глюкозы.
Содержание глюкозы в крови здорового человека колеблется от 0,8 до 1,2 г/л [Руководство к лабораторным занятиям по биологической химии. /Под ред. проф. Т.Т.Березова. М., Медицина. 1976 г. с.138].
При некоторых заболеваниях содержание сахара в крови возрастает (гипергликемия) и может достигать в тяжелых случаях 50-80 г/л. Параллельно увеличивается содержание глюкозы в ротовой жидкости [Денисов А.Б. Слюнные железы. Слюна. М., Изд. РАМН, 2005 г. с.53] и сахар обнаруживается в моче.
Понижение содержания сахара в крови (гипогликемия) наблюдается реже и связано с нарушением функций печени и поджелудочной железы.
Методы определения глюкозы в водных растворах и крови человека весьма многочисленны [Камышников B.C. Клинико-биохимическая лабораторная диагностика. Справочник в двух томах. Том II, с.10] и делятся на ферментативные и неферментативные.
Аналогом заявленного способа авторы предлагают наиболее распространенный ферментативный метод определения глюкозы в крови с помощью препарата, содержащего ферменты, глюкозооксидазу и пероксидазу (по В.К.Городецкому) [Руководство к лабораторным занятиям по биологической химии. /Под ред. проф. Т.Т.Березова. М.: Медицина, 1976 г. с.
141], отличается высокой специфичностью, но позволяет определять глюкозу в исследуемой жидкости только при содержании от 0,2 до 4,0 г/л. Он включает 3 ступени биохимических превращений и 4- чисто химическую: окисление о-толуидина с последующим фотоколориметрическим определением окисленной формы красителя методом калибровочного графика.
Использование четырехступенчатой цепочки превращений с применением рабочего раствора, содержащего два ферментативных препарата, усложняет технику выполнения анализа и увеличивает вероятность ошибки эксперимента. Нельзя не отметить, что применение в лабораторной практике ароматического амина о-толуидина влечет за собой опасность канцерогенеза.
Прототипом заявленного способа авторы считают неферментативное определение глюкозы по Хагедорну-Иенсену в безбелковом фильтрате крови [Руководство к лабораторным занятиям по биологической химии /Под ред. проф. Т.Т.Березова. М., Медицина, 1976 г. с.138].
Метод основан на восстановлении железа (III) в составе гексацианоферрата (III) калия (красной кровяной соли) до железа (II) с получением желтой кровяной соли K4[Fe(CN)6] при нагревании в щелочной среде Избыток красной кровяной соли определяется иодометрическим титрованием.
Свободный иод, выделившийся в количестве, эквивалентном избытку K3[Fe(CN)6], оттитровывается раствором Na2S2O3.
Определение сахара производят в безбелковом фильтрате крови, поэтому необходимо предварительно осадить белки крови. Для этого берут 2 пронумерованные пробирки, в каждую из них наливают из бюретки по 5 мл 0,45% раствора сернокислого цинка и по 1 мл 0,1 н. NaOH. Образуется студенистый осадок гидроксида цинка.
В микропипетку, предварительно сполоснутую раствором оксалата натрия, набирают 0,1 мл крови. Пипетку с кровью погружают до дна в пробирку 1 с гидроксидом цинка, осторожно выдувают кровь и промывают пипетку 2-3 раза путем втягивания и выпускания верхнего слоя жидкости.
Таким же образом сухой пипеткой (или той же самой, сполоснутой раствором оксалата натрия) набирают кровь в пробирку 2. Пробирки 3 и 4 — контрольные (без крови).
Затем все четыре пробирки помещают в кипящую водяную баню на 3 мин и по истечении этого времени вынимают и ставят в штатив.
Жидкость во всех четырех пробирках фильтруют в заранее пронумерованные сахарные стаканчики через вату, которая кладется в виде маленького плотного кусочка в конус воронок.
Вату предварительно промывают дистиллированной горячей водой 3 раза, при этом каждый раз отжимают ее, надавливая ладонью на края воронки.
Пробирки, в которых нагревалась кровь, и воронки с ватой после того, как отфильтрована вся жидкость, промывают 3 раза горячей дистиллированной водой по 1-3 мл (вату каждый раз отжимают указанным выше способом).
К фильтрату в каждый стаканчик прибавляют по 2 мл щелочного раствора железосинеродистого калия и пробы нагревают в кипящей водяной бане точно 15 мин (за это время глюкоза полностью окисляется).
После охлаждения к жидкости добавляют 3 мл тройного раствора (смесь растворов ZnSO4, NaCI, KI). Содержимое стаканчиков перемешивают взбалтыванием и подкисляют 2 мл 3% уксусной кислоты.
Выделившийся иод оттитровывают тиосульфатом натрия (Na2S2O3), используя в качестве индикатора 2 капли 1% раствора крахмала; титруют до исчезновения синей краски.
Чтобы предотвратить образование железосинеродистого калия из железистосинеродистого калия, последний выводится из сферы реакции с помощью сернокислого цинка. Добавление сернокислого цинка приводит к образованию нерастворимой комплексной соли.
Количество сахара в крови вычисляют по данным титрования с помощью эмпирически составленной авторами метода таблицы.
Ввиду того, что ряд соединений неуглеводного характера (мочевая кислота, глютатион и др.) обладают наряду с глюкозой способностью восстанавливать ионы тяжелых и переходных металлов, результаты анализа оказываются завышенными. Ошибка может достигать 10-20%.
- Четырехэтапное определение глюкозы с предварительным осаждением белков крови и приготовлением достаточно большого количества титрованных растворов требуют от аналитика значительных затрат времени на подготовку и проведение анализа.
- Авторы предлагают быстрый и доступный метод определения глюкозы в ротовой жидкости, имеющий определенные преимущества по сравнению с описанными выше классическими методами.
- При значительном сокращении времени проведения анализа для его осуществления не требуется каких-либо редких реактивов и специальных приборов. Анализ выполняют следующим образом:
оборудование и реактивы: водяная баня, лабораторный термометр на 100°С, 2N раствор КОН, 0,1% р-р метиленового синего, градуированные термостойкие пробирки (по числу проб ротовой жидкости), неградуированные пипетки — 2 шт., дистиллированная вода.
Ход определения:
в пробирку набирают 1 мл свежеотобранной ротовой жидкости, добавляют 1 мл дистиллированной воды, 2 капли 2N раствор КОН и 3 капли 0,1%-ного р-ра метиленового синего. Перемешивают встряхиванием и нагревают на водяной бане до ˜80°С (±2°С).
При содержании глюкозы в анализируемом образце>0,12% наблюдается полное исчезновение синей окраски индикатора. При меньшем содержании глюкозы окраска сохраняется.
Заявленным способом было протестировано 50 образцов ротовой жидкости (смешанной слюны), взятых у пациентов стоматологической поликлиники с жалобами на состояние пародонта.
Ротовая жидкость собиралась натощак после тщательного прополаскивания ротовой полости дистиллированной водой.
Содержание глюкозы, превышающее 0,12%, было обнаружено в смешанной слюне шести пациентов, у которых в дальнейшем при обследовании были обнаружены нарушения функции поджелудочной железы.
Клинический пример №1
Амбулаторная карта №76278. Пациентка Н., 56 лет, обратилась в стоматологическую поликлинику в сентябре 2006 г. с жалобами на состояние пародонта. В образце ротовой жидкости предложенными авторами способом обнаружено повышенное содержание глюкозы (>0,12%).
При дальнейшем обследовании у эндокринолога и в крови пациента было обнаружено содержание сахара, превышающее норму.
Клинический пример №2
Амбулаторная карта №69179. Пациент Т., 47 лет, обратился в стоматологическую поликлинику в сентябре 2006 г. с жалобами на состояние пародонта. Предложенным авторами способом в образце ротовой жидкости не обнаружено превышения содержания глюкозы. Анализ крови, выполненный параллельно с анализом ротовой жидкости, также показал содержание глюкозы в пределах нормы.
Способ определения глюкозы в ротовой жидкости, включающий определение содержания глюкозы в биологической жидкости, отличающийся тем, что к 1 мл свежеотобранной ротовой жидкости добавляют 1 мл дистиллированной воды, 2 капли 2 N раствора КОН и 3 капли 0,1%-ного раствора метиленового синего, перемешивают содержимое встряхиванием и нагревают на водяной бане до 80°С (±2°С) и при сохранении синей окраски индикатора говорят о нормальном содержании глюкозы в ротовой жидкости — менее 0,12%, а при полном исчезновении синей окраски индикатора делают выводы о превышении нормального значения содержания глюкозы в ротовой жидкости.
Диабет выявит анализ слюны — Лечение в Израиле — Клиника Израиля №1
Как известно, сахарный диабет является одним из бичей современной цивилизации. Культура потребления не стимулирует людей соблюдать здоровый образ жизни, что для многих оборачивается потерей здоровья.
Одним из результатов современного образа жизни может стать сахарный диабет.
Ввиду высокой распространенности данной патологии исследования, посвященные лечению и диагностике диабета, на сегодняшний день имеет большую популярность.
Недавно ученые из Калифорнийского университета Лос-Анджелеса внесли свой вклад в изучение данного заболевания. Научная работа этих исследователей была направлена на поиск новых методов диагностики сахарного диабета на ранних стадиях развития.
Для решения данной проблемы ими было предложено использовать анализ слюны.
Ученые утверждают, что это простое лабораторное исследование дает возможность распознать не только начальные стадии нарушения углеводного обмена, но и выявить аутоиммунные и неврологические расстройства.
Уникальный метод, предложенный американскими учеными, основан на анализе молекул РНК, содержащихся в слюне человека. Исследование показало, что именно эта биологическая жидкость включает большое количество диагностически важных молекул, которые не могут быть обнаружены в крови.
Старший автор исследования доктор Дэвид Вон рассказал: «Всем нам следует задаться вопросом, возможно ли применение компонентов слюны для диагностики заболеваний. Может именно это исследование пригодится для достижения конкретных медицинских целей». Также доктор Вон заявил, что анализ слюны может использоваться не только для диагностики сахарного диабета.
С его помощью можно выявить, например, рак желудка и некоторые другие заболевания.
«Если мы не будет анализировать состав слюны, мы можем упустить важные признаки заболевания. Слюна это настоящее сокровище, способное по-настоящему удивить человечество» – рассказал Дэвид Вон. На сегодняшний день для раннего выявления данной патологии используется лабораторный анализ других показателей.
Прежде всего, выявление диабета базируется на анализе крови. Важно помнить, что разовое определение концентрации глюкозы крови утром натощак не является достаточным критерием для постановки или исключения сахарного диабета. Для оценки степени сохранности углеводного обмена необходимо проведение глюкозотолерантного теста.
Это исследование с нагрузкой глюкозой позволит оценить то, как организм реагирует на введение достаточно большого количества углеводов. При этом выполнение глюкозотолерантного теста рекомендуется не только при появлении признаков болезни, но и с профилактической целью некоторым категориям лиц.
Это люди с избыточной массой тела, высоким уровнем холестерина и триглицеридов, родственники больных сахарным диабетом. Выполнение данного исследования приобретает особую актуальность после 45 лет.
Позаботиться о своем здоровье рекомендуется и женщинам, которые страдали гестационным сахарным диабетом, имели выкидыши, роды крупным плодом, преждевременные роды.
Анализ мочи на сахар и ацетон оказываются положительными, как правило, на поздних стадиях развития сахарного диабета.
Контролировать концентрацию сахара в крови на протяжении длительного времени позволяют такие показатели как фруктозамин и гликированный гемоглобин.
Определение содержания этих веществ позволяет избежать выставления ложных диагнозов при выполнении разового анализа сахара в крови. Кроме того эти исследования помогают контролировать эффективность лечения сахарного диабета.
Пациентам с факторами риска развития данного заболевания следует обратить пристальное внимание на свой образ жизни. Регулярные физические нагрузки и низкоуглеводная диета являются эффективными методами профилактики данного патологического состояния. Регулярное же посещение специалиста поможет выявить начальные нарушения, легко поддающиеся коррекции.
Измерение сахара крови: обзор всех возможных способов
Одной из самых болезненных тем для диабетиков является необходимость постоянного контроля уровня сахара крови. Но все бы ничего, если бы для этого не требовалось прокалывать палец. Количество проколов в среднем варьируется от 3 до 7 раз в день, а это уже не мало. Данная проблема по актуальности стоит наравне с самим лечением диабета.
- Винокур Мария — медицинский редактор
- access_time
Какие существуют способы глюкометрии (измерения сахара крови):
Первым и самым достоверным способом определения уровня глюкозы крови является лабораторное исследование, где используется венозная кровь. Её нормы немного отличаются от капиллярной.(таб. с нормами)
Естественно, что этот способ используется лишь при постановке диагноза или в условиях стационарного лечения и для постоянного контроля не подходит.
Из экспресс-методов самым примитивным является использование тест полосок, которые при контакте с жидкостью изменяют свой цвет в зависимости от концентрации глюкозы.
После окончания реакции полученный цвет сравнивают с цветовой шкалой на упаковке и судят о количестве сахара в исследуемом материале. Существуют полоски, адаптированные как для крови, так и для мочи.
В узкой эндокринологической практике встречаются не часто, ведь четкой количественной характеристики гликемии не дают, а служат лишь скрининговым методом.
Самым распространенным и надежным в домашних условиях считается использование портативного глюкометра со специальными тест-полосками.
Вариации дизайна, размера и цены охватить сложно.
Существуют механизмы различных уровней сложности, одни из них рассчитаны только на измерение глюкозы, в других также используются полоски для определения уровня холестерина и триглицеридов крови.
Также глюкометры отличаются разными объемами памяти для хранения результатов предыдущих измерений и возможностью ставить метки до или после еды было сделано измерение. Для проведения анализа чаще всего требуется капля крови из пальца, но существуют глюкометры, адаптированные для анализа крови из предплечья, бедра, плеча или бугорков ладони.
Измерение сахара без проколов
Говоря о глюметрии невозможно не упомянуть о предмете мечтаний многих диабетиков – неинвазивных глюкометрах, то есть тех, которые не требуют прокола кожи. На данный момент на рынке представлены несколько таких чудо-устройств с самыми разнообразными способами забора информации.
Омелон А-1 – устройство, которое самым загадочным образом по сопоставлению пульса и артериального давления может определить уровень сахара крови.
По отзывам пациентов, испытавших этот аппарат, можно сказать, что кто-то очень сильно погорячился с громким названием «глюкометр», ведь результаты измерений далеки от истины и больше напоминают рандомный подбор чисел.
Данный прибор не рекомендован для использования при инсулинотерапии. И подходит только диабетикам со 2 типом (инсулиннезависимым).
GluсoTrack является одним из немногих неинвазивных глюкометров, который прошел контроль качества в Европе. Он представляет собой аппарат, датчик которого оформлен в виде ушной клипсы.
Принцип работы скрывается в тройном анализе: электромагнитном, ультразвуковом и термальном. В результате комбинации этих трех показателей можно судить об уровне сахара крови с достаточно высокой точностью.
Системы непрерывного мониторинга глюкозы
Также существуют системы беспрерывного мониторирования уровня глюкозы крови. Одним из них является FreeStyleLibre. Механизм состоит из датчика, который крепится на коже, и считывающего устройства. Замена датчика производится 1 раз в 14 дней. Ознакомиться детальней с этим устройством вы можете по этой ссылке.
Похожий принцип работы и у системы постоянного мониторинга Dexcom. Принцип работы и установки советуем посмотреть в видео:
Не стоит также забывать и о встроенных системах мониторинга сахара в крови, которые встречаются в последних моделях инсулиновых помп. Система работы построена таким образом, что пользователю не нужно делать никаких проколов, кроме места присоединения канюли помпы. Встроенный сенсор определяет уровень сахара в крови и сигнализирует при опасных порогах гликемии. Что очень удобно в ночные часы. При низком уровне СК помпа приостанавливает подачу инсулина.
О перспективах:
SymphonytCGM сейчас находится на этапе последних испытаний и регистрации в США и Европе. Этот глюкометр представляет собой сенсор, который крепится на кожу, предварительно пропиллингованную с помощью специальной системы PreludeSkinPrep. В основу работы положено измерение уровня сахара в верхних слоях кожи, что не требует никаких проколов и контакта с кровью.
Уже совсем скоро на рынок Европы выйдет глюкометр в виде пластыря sugarBEAT. Удобство данного механизма заключается в том, что измерения производятся каждые пять минут и передаются на любой другой носитель информации с помощью системы Bluetooth.
Единственным недостатком sugarBEAT можно считать то, что для калибровки все же необходимо ежедневно прокалывать палец и определять уровень глюкозы при помощи обычного глюкометра. В любом случае это только один прокол, что уже существенно облегчает жизнь диабетику.
ДИАинструктаж: тест-полоски
Как работают тест-полоски?
Когда кровь помещают на тест-полоску, она вступает в реакцию с химическим веществом (ферментом) – глюкозооксидазой, который окисляет глюкозу до глюконовой кислоты с образованием пероксида водорода. На другом конце тест-полоски глюкометр передает на нее ток.
Тест-полоска имеет электрические клеммы, которые позволяют прибору измерить ток между клеммами. Ток меняется в зависимости от уровня глюконовой кислоты.
Глюкометр затем использует алгоритм для определения уровня глюкозы крови, основанный на показателях сопротивления тока.
Количество крови, необходимое для анализа варьирует между производителями глюкометров. Как правило, требуется от 0,5 мкл до 1 мкл крови.
Существуют визуальные тест-полоски для определения концентрации глюкозы крови, однако, этот метод менее точен и реже используется в наши дни.
Каков срок годности тест-полосок?
В среднем срок годности тест-полосок составляет около 2 лет (при условии соблюдения правил хранения). После вскрытия тубуса полоски нужно использовать в течение 3-6 месяцев, но не забудьте проверить срок годности на упаковке. Если у вас есть несколько упаковок с тест-полосками, начните с более «старой» упаковки.
- Правила хранения упаковок с тест-полосками:
- • при комнатной температуре
- • не подвергать избыточному воздействию тепла или холода
- • в закрытом (герметичном) флаконе
- • не использовать тест-полоски, которые были в контакте с грязью, крошками, пищевыми продуктами или жидкостями
- Насколько точны тест-полоски?
Тест-полоски должны соответствовать стандартам Международной организации по стандартизации (ISO), при использовании совместно с глюкометром, к которому они предназначены.
В каждом глюкометре заложен диапазон ошибки измерения 20% (согласно ISO 15197), поэтому результаты измерения глюкозы крови на разных приборах и лаборатории одновременно могут несколько отличаться. А в 5% случаев ошибка при измерении может превысить 20%.
Кроме того, современные глюкометры показывают уровень глюкозы в ПЛАЗМЕ (будучи калиброваны по плазме крови), что выше данных лаборатории для КАПИЛЛЯРНОЙ крови на 11-15%.
Будут ли нужны тест-полоски в будущем?
Сейчас ведутся разработки для создания неинвазивного метода определения глюкозы крови (тестирование слезной жидкости, слюны), без прокалывания пальцев и без тест-полосок. Современная система непрерывного мониторирования уровня глюкозы крови, становясь все более доступной, все еще не может полностью заменить глюкометр. Будем ждать и следить за новыми разработками!
Глюкоза в крови
Определение глюкозы в крови – один из наиболее широко распространенных тестов в клинической лабораторной диагностике. Глюкозу определяют в плазме, сыворотке, цельной крови.
Согласно Руководству по лабораторной диагностике диабета, представленному Американской Ассоциацией диабета (2011 г.
), не рекомендуется измерять глюкозу в сыворотке крови при диагностике диабета, поскольку именно использование плазмы позволяет быстро центрифугировать образцы, чтобы предотвратить гликолиз, не дожидаясь образования сгустка.
Различия в концентрации глюкозы в цельной крови и плазме требуют особого внимания при трактовке результатов.
Концентрация глюкозы в плазме выше, чем в цельной крови, причем различие зависит от величины гематокрита, следовательно, использование некоего постоянного коэффициента для сопоставления уровня глюкозы в крови и плазме может привести к ошибочным результатам. Согласно рекомендациям ВОЗ (2006 г.
), стандартным методом для определения концентрации глюкозы должен быть метод определения глюкозы в плазме венозной крови. Концентрация глюкозы в плазме венозной и капиллярной крови не отличается натощак, однако через 2 ч после нагрузки глюкозой отличия существенны (Табл.).
Норма | ||||
Натощак | 3,3–5,5 | 3,3–5,5 | 4,0–6,1 | 4,0–6,1 |
Через 2 часа после ПГТТ | 12,2 |
На уровень глюкозы в биологическом образце значительное влияние оказывает его хранение. При хранении образцов при комнатной температуре в результате гликолиза происходит существенное снижение содержания глюкозы.
Для ингибирования процессов гликолиза и стабилизации уровня глюкозы в пробу крови добавляют фторид натрия (NaF). При взятии образца крови, согласно докладу экспертов ВОЗ (2006 г.
), если немедленное отделение плазмы невозможно, образец цельной крови должен быть помещен в пробирку, содержащую ингибитор гликолиза, которую следует хранить во льду до выделения плазмы или проведения анализа.
Показания к исследованию
- Диагностика и мониторинг СД;
- заболевания эндокринной системы (патология щитовидной железы, надпочечников, гипофиза);
- заболевания печени;
- ожирение;
- беременность.
Особенности взятия и хранения образца. Перед исследованием необходимо исключить повышенные психо-эмоциональные и физические нагрузки.
Предпочтительно – плазма венозной крови. Образец следует отделить от форменных элементов не позднее, чем через 30 мин после взятия крови, избегать гемолиза.
Образцы стабильны не более 24 ч при 2–8 °C.
Метод исследования. В настоящее время в лабораторной практике наибольшее распространение получили ферментативные методы определения концентрации глюкозы – гексокиназный и глюкозооксидазный.
Повышенные значения
- СД 1 или 2 типа;
- диабет беременных;
- заболевания эндокринной системы (акромегалия, феохромоцитома, синдром Кушинга, тиреотоксикоз, глюкоганома);
- гемахроматоз;
- панкреатит острый и хронический;
- кардиогенный шок;
- хронические заболевания печени и почек;
- физические упражнения, сильное эмоциональное напряжение, стресс.
Пониженные значения
- Передозировка инсулина или гипогликемических препаратов у больных СД;
- заболевания поджелудочной железы (гиперплазия, опухоли), вызывающие нарушение синтеза инсулина;
- дефицит гормонов, обладающих контринсулярным действием;
- гликогенозы;
- онкологические заболевания;
- тяжелая печеночная недостаточность, поражения печени, вызванные отравлением;
- заболевания ЖКТ, нарушающие всасывание углеводов.
- алкоголизм;
- интенсивная физическая нагрузка, лихорадочные состояния.